如何快速估算每次实验放几只动物？

动物实验设计应遵循实行“3R原则”，包括实验动物的替代、减少和优化原则，其中减少即指尽量减少实验动物的数量。查阅文献，并未发现对实验动物数目有绝对要求，但在减少的同时，一定要满足统计学要求。统计学上要求一般至少每组有6个可用数据，才有意义。一般小鼠的每组一般不少于10只；一般大鼠每组不少于6只；大动物等级越高，价格越贵，根据情况可适当减少，但一般不能少于4-5只。作为实验设计者，我们不仅仅知其然，也要知其所以然1、为什么要进行样本量估算？科学性要求：使研究设计更加严谨。伦理学...

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细胞传代培养的流程和注意事项

细胞传代培养的流程和注意事项如下：1、当细胞密度达到其生长密度高处时（一般肿瘤细胞为80-100%，原代细胞和干细胞为80-90%，有些细胞为40-50%，熟知所养细胞的生长密度极限），移除旧培养液；2、用PBS洗涤两次（旧培养中的钙离子会抑制胰酶的活性），加入1ml胰酶消化液（以T25培养瓶为例），立即盖好盖子，把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞漂起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱...

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TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验

TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验细胞凋亡中,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化（细胞凋亡）的方法。...

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如何使用马弗炉融化金属粉末？

使用马弗炉融化金属粉末是在实验室或工业生产中常见的一种操作，需要遵循安全规程和科学的操作步骤。以下是一个基本的操作流程：准备工作：在开始之前，确保马弗炉已经清洁，并预热至所需的温度。准备金属粉末，确认其化学成分和纯度，确保它适合在马弗炉中融化。准备适当的融化工具，如耐火勺或crucible（坩埚）。装载金属粉末：将金属粉末装入耐火材料制成的坩埚中，注意不要装得太满，以免在融化过程中溢出。放入马弗炉：轻轻地将装有金属粉末的坩埚放入马弗炉内。慢慢升降温度的速度不可太快，以免金属粉...

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免疫组化实验常见问题分析

1.IHC实验结果显色过深一抗浓度过高或孵育时间过长——降低一抗浓度或减少孵育时间孵育温度过高——选择4℃或室温孵育2.实验结果存在非特异性显色石蜡切片脱蜡——延长脱蜡时间蛋白封闭不充分——增加蛋白封闭时间组织富含内源性生物素与过氧化物酶——使用相关试剂进行封闭3.实验结果显色弱或无染色一抗浓度过低或孵育时间过短——增加一抗浓度或延长孵育时间组织中无目的抗原的表达一抗种属来源与二抗不匹配注意事项切片脱蜡和水化要充分，加反应液时要覆盖组织充分；每次加液前甩干洗涤液，同时防止干片...

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细胞培养板的选购技巧

细胞培养板是进行细胞培养的重要工具，选择适合的细胞培养板对于细胞的生长和实验结果具有重要影响。本文将介绍一些选择细胞培养板的关键因素，并提供一些应用案例进行说明。1.培养板材质：细胞培养板的材质是一个重要的考虑因素。目前市场上主要有塑料和玻璃两种材质的培养板。塑料培养板价格较低且易于使用，而玻璃培养板具有更好的透明度和耐高温的特性。根据实验需要，可以选择适合的材质。2.表面涂层：细胞培养板的表面涂层可以影响细胞黏附和增殖。常用的涂层包括凝胶体、胶原蛋白、明胶等。例如，凝胶体涂...

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微生物检验中培养基制备的注意事项

培养基的作用是为微生物提供生长和繁殖所需的营养物质和环境条件。培养基的质量直接关系到检验结果的准确性和可靠性，因此对于微生物检验而言，培养基的质量控制尤为重要。培养基的主要作用有两方面：①提供微生物生长所需的营养物质；②培养基具有选择性和差异性，可以选择特定类型的细菌或真菌进行培养，并区分不同种类的微生物。因此，在微生物检验中，必须对培养基进行严格的质量控制，只有优质的培养基才能为微生物检验提供精准、可靠的检测结果。培养基的概述培养基是用于保证微生物繁殖、鉴定、保持活力的物质...

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海马神经元细胞分离培养实验

海马神经元细胞分离培养实验1、仪器CO2细胞培养箱，解剖镜，眼科镊，眼科剪2、动物新生鼠（SD大鼠）3、耗材DMEM/F12培养基、聚赖氨酸实验步骤：包被：培养前一天将培养板或培养瓶或皿用0.01%多聚赖氨酸包被过夜。第二天早上来吸除包被液在无菌超净台中自然晾干后放置于CO2细胞培养箱中备用。配制神经元专用培养基（DMEM/F12培养基中添加1%谷氨酰胺，2%B27，1%双抗）取脑：选取新生24h之内的SD大鼠数只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,断头处死,无菌条件下分层剪开头...

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