大牛是这样做成骨细胞诱导实验的！

一、实材料及试剂培养板、酒精灯、移液枪、CO2培养箱、显微镜等MC3T3-E1（前成骨细二、实验内容试验方法：将MC3T3-E1（前成骨细胞）细胞接种于含MEM-α培养基（10%胎牛血清，1%青链霉素）的培养瓶内，放置于二氧化碳培养箱（37℃，5%CO2，潮湿）培养，每三天更换一次培养液，待细胞铺满瓶底的80%以上时，用胰蛋白酶消化，加入MEM-α培养基（10%胎牛血清，1%青链霉素），将细胞吹打下来并吸取到10mL离心管中，离心，弃上清，注意不要碰到管口，加入MEM-α培养...

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贴壁细胞和悬浮细胞免疫荧光染色方法

【步骤】(以间接免疫荧光法为例)1细胞准备与固定(1)单层生长细胞：取对数生长细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中，置二氧化碳培养箱培养1-3天，待细胞接近长成单层，取出盖玻片，进入PBS(0.01mol/L,pH7.4)洗2次，然后根据实验目的，选择适当固定剂固定细胞。常用固定剂有：95%乙醇(固定时间10-30min)，丙酮(5-10min)等。(2)悬浮生长细胞：取对数生长细胞，用PBS离心洗涤(1...

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关于二氧化碳培养箱的几个常见问题

二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（37°C）、稳定的CO2水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2-7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置，是细胞、组织、细菌培养的一种先进仪器，是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备。今天喆图小编就来给大家解答一下二氧化碳培养箱的几个常见问题。1、二氧化碳培养箱的滤器能用多长时间?半年到几年的都有，建议用户1年更换一次...

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二氧化碳培养箱如何对CO2浓度进行控制

二氧化碳培养箱浓度可以通过红外传感器(IR)或热导传感器(TC)进行测量。两种传感器各有优缺点。热导传感器：热导传感器监控CO2浓度的工作原理是基于对内腔空气热导率的连续测量，输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化，这样就会产生一个与CO2浓度直接成正比的电信号。TC控制系统的一个缺点就是箱内温度和相对湿度的改变会影响传感器的精确度。当箱门被频繁打开时，不仅CO2浓度，温度和相对湿度也会发生很大的波动，因而影响了TC传感器的精度。当需要精确的培养条件和频繁开启二...

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无菌操作在细胞培养中的关键作用

无菌操作是决定细胞培养成败的关键因素，即便使用设备完善的实验室，若实验者粗心大意，操作不规范，也会导致污染。因此，所有操作都要最大可能的保证无菌，每一项工作都必须做到有条不紊和*可靠。1、实验进行前：在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品，如二氧化碳培养箱、净化工作台、离心机等，清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后，因物品不全往返拿取而增加污染机会。2、无菌操作工作区...

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细胞瞬时转染原理及实验步骤

细胞复苏细胞复苏是将保存在液氮或-80℃冰箱中的细胞株解冻并重新培养的过程。细胞复苏的关键是快速。防止在解冻过程中，产生的水珠形成冰晶损伤细胞。细胞复苏一般步骤如下：1.预先加热水浴锅，温度至37-40℃，并在离心管中准备好10mL培养基2.从液氮罐或冰箱中取出细胞，迅速放进预热的水浴锅中，镊子夹住冻存管晃动，使其受热均匀3.当冻存管内*融化时，注意用酒精擦拭冻存管消毒，将液体倒入含有10mL培养基的离心管中4.离心5min，去除上清，得到沉淀5.用培养基悬浮沉淀，并接种到培...

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二氧化碳培养箱小课堂

1）对于哺乳动物细胞在自然的温度生长最好，CO2气体维持在体内pH值，类似于在血液中二氧化碳CO2浓度；高湿度能防止培养基的蒸发；所有这些环境参数确保细胞正常表达蛋白质。适当的培养环境对于敏感的原代细胞和干细胞尤其重要。但是每次打开二氧化碳培养箱的门时，培养箱内的条件受到实验室环境影响急剧变化。一旦关上门，培养箱重新快速恢复设置参数。细胞是否能长时间在设定条件下生长,取决打开培养箱门的时间和频次,培养箱结构和反馈调节系统。2）不同的结构和反馈调节系统会导致*不同的恢复时间。结...

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高温马弗炉烘炉原因和作用及什么时候要烘炉

高温马弗炉烘炉原因和作用：高温马弗炉什么时候要烘炉？下面喆图小编依靠专业知识汇总了高温马弗炉进行烘炉的原因和作用。对高温马弗炉进行烘炉的原因和作用：高温马弗炉，智能马弗炉等高温电炉在长期放置后，高温马弗炉内部的氧化铝陶瓷纤维、加热元件碳化硅、耐火砖等保温材料吸收空气中的水分，长期放置后再次使用我们需要将保温材料烘干，达到良好的实验环境，提高高温马弗炉的使用寿命和精度。如何判断高温马弗炉需要烘炉：高温马弗炉何时需要烘炉？很简单，如果厂家没有进行烘炉，需进行烘炉处理。长期搁置后再...

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