二氧化碳培养箱对温湿度以及气路的控制

气路的控制气路由高浓度的CO2钢瓶、气泵、稳压阀、针型阀，电磁阀、流量计及储气瓶等组成。(高浓度的CO2钢瓶由用户自备)。当输入一定压力的高浓度CO2气体，通过调节阀、针阀及电磁阀的流量、时间控制，保证一定量的CO2气体进入工作室，达到自动控制工作室内的CO2浓度值。该值同时通过显示电路显示，便于观察了解。为方便用户在使用中进行浓度的监视和采样，在二氧化碳培养箱的后背面装有采样、监视口。因采用了快慢速双重充气法，使二氧化碳培养箱在开、关门后，工作室内的CO2浓度能快速恢复且无...

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二氧化碳培养箱做细胞培养及冻存

实验材料二氧化碳培养箱、液氮罐、超低温低温冰箱、电热恒温水浴锅、离心机等。培养皿、滴瓶、吸管、离心管、烧杯、量筒、三角瓶、培养瓶等下面喆图小编给大家说下简易的实验步骤将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃电热恒温水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM*培养基，轻轻吹匀，离心2min，弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗，弃上清液。加入10mlDMEM*培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5%CO2的二氧化碳培养箱中培养。细胞密度达到...

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用帖壁法纯化巨噬细胞

1．用含20％～40％小牛血清的RPMI-1640培养液将巨噬细胞配成2×106～4×106/ml的浓度。以每平方厘米2×105～4×105个巨噬细胞的密度将细胞悬液接种到玻璃培养皿（瓶）或塑料培养皿（瓶）中。37℃5％CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养1小时或24小时。1小时培养节省时间但会丢失一些粘附力弱的巨噬细胞，而24小时可以得到较多的巨噬细胞。20％～40％的小牛血清可以减少B淋巴细胞的粘附。2．摇晃培养皿（瓶），悬浮未粘附细胞，吸出细胞悬液。用预温的Hanks液...

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羊水细胞培养

羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以分析胎儿染色体核型。目前国内外大都采用腹腔羊膜穿刺术，妊娠12-30周的羊水细胞均可培养成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色体分析，最佳孕周为16周左右。因此时羊水增长快，羊水中细胞较多，细胞培养易于生长，而且不易损伤胎儿。国内多数选择的穿刺时间在妊娠的第16-30周。国外现已较多地采用妊娠早期的羊膜穿刺，但需在B超下定位及穿刺。羊水量按妊娠时间大致计算（1ml/w）。资料表明，穿刺病例的妊娠结局、分娩方式、胎儿的出生体重等与未穿刺无明显...

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靶细胞杀伤实验：LDH法

一、效应细胞的制备激惹5天后，于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结，100目钢网研磨，调整细胞浓度为2×107.ml-1。台盼蓝色要求存活率95%。二、靶细胞的制备P815细胞株系DBA/2小鼠的肥大细胞瘤细胞株。连续传代培养，调整细胞浓度为2×105/ml或3.33×105/ml（加入α-Lyt2mAb时的靶细胞浓度），台盼蓝染色成活率95%。三、LDH释放法测定CTL的功能按表1加样于96孔培养板中，设3个复孔。混匀置二氧化碳培养箱中孵育4h。室温离心，用微量加样器每孔...

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研究T细胞产生的细胞因子的3种方法

1）研究细胞因子mRNA的方法绝大多数细胞因子mRNA在T细胞中只短暂存在，其存在的量与T细胞产生细胞因子的量也有很好的相关性。所以，在大多数情况下，细胞内mRNA的量可以反映细胞产生细胞因子的情况。检测细胞因子mRNA的试验主要有：竞争性聚合酶链反应、Northern印迹杂交、斑点杂交、逆转录聚合酶链反应、原位杂交。2）研究细胞因子的免疫检测法免疫检测法主要有放射免疫检测法、酶免疫测定法、免疫荧光测定法和免疫发光测定法等。3）研究细胞因子的生物学方法1．用含10％小牛血清的...

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噬神经元的腺病毒载体的构建

实验试剂人类胚胎肾（HEK）293T细胞腺病毒转移载体质粒腺病毒包装载体PLP1，pLP2（之前），PLP/VSVGDMEM培养基青霉素，链霉素-谷氨酰胺（100X）磷酸盐缓冲液PBS（-）胎牛血清凝聚胺实验设备10-cm的细胞培养皿50毫升锥形离心管Steriflip-GP过滤器（0.22微米）超离心管17.0mL5％二氧化碳培养箱荧光显微镜生物安全柜离心机实验材料2.5M氯化钙溶液：36.75克氯化钙，70毫升双蒸H2O，通过0.22μm滤膜过滤，体积调制100毫升...

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细胞介导细胞毒作用检测法：时间分辩荧光分析法

时间分辩荧光分析法1）铕荧光检测法标记靶细胞1．EuCl3的制备：称取58.08mgEu2O3，用少量1NHCl搅拌至溶解，再用1NNaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存备用。2．用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml，加50μl10mg/ml硫酸葡聚糖，置冰浴中20分钟，其间摇晃数次。3．加入30μl100mmol/LCaCl2溶液终止反应5分钟。4．用含2mmol/LCaCl2的RPMI-1640培养液洗涤细胞5次。用含...

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